多糖是由糖苷键结合的糖链,至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物。单糖组成测定分析是研究多糖结构的基础,常通过酸解将多糖分解为单糖,利用离子色谱对多糖中的单糖组分及含量进行测定。由于糖链结构的多样性和不一致性,因此要求测定其单糖含量包括中性糖、氨基糖、唾液酸等,并建立一种简便、灵敏的检测方法用以鉴定多糖类药物和糖蛋白药与其糖基化的关系和单糖组成。单糖组成分析是对多糖以及糖蛋白中多种单糖组分的定性、定量分析。该分析方法可被用来分析多糖结构以及在多糖类药物研发或生产中起到质量控制的作用。
在药物开发的所有阶段,需具备分析糖蛋白和碳水化合物的能力,以测定所存在单糖的特性和数量。单糖成分分析有助您识别糖基化类型(如N-连接和/或O-连接),以及已发生糖基化的程度。
百欧泰拥有多年的组学研究经验,可实现单糖的快速定性和定量,可分析几乎所有的单糖和大部分寡糖及低聚糖。
关键词:多糖,单糖,糖类结构解析,单糖组分分析
服务步骤
1 样品称重
2 上样处理
如果为多糖需通过碱水解、酸水解、酶解以及电磁辐射、超声波等多种方式降解为单糖
溶于缓冲液,调节最终上样浓度为0.2%
3 上机分析
选定适宜的流速,控制参数
4 数据分析
5 交付
服务常用方法
1 高效液相色谱法
高效液相色谱法用于单糖组成分析时具有分离速度快、分辨率高、分离效果好、重现性好和不破坏样品等优点。但因糖类本身没有紫外吸收,只能利用示差折光检测器或蒸发光散射检测器检测。采用高效液相色谱法分析时,色谱柱的选择也较为困难。
总之,高效液相色谱法适合于大多数糖类物质的单糖组成分析,并要求采用合适的分析柱以及选择合适的衍生方法来确保单糖能有效分离和检测。
2 高效阴离子交换色谱安培检测法
高效阴离子交换色谱安培检测法的优点在于不需对单糖柱前衍生就可分析几乎所有的单糖和大部分的寡糖及低聚糖。一般只需20min即可将中性糖和氨基糖分开,减少总分析时间。而且通过自动进样器完成进样程序以及在线淋洗发生器配制不同浓度流动相即可实现梯度洗脱,实现了高自动化和智能化操作。
该法的缺点是使用较高pH值溶液淋洗,需要专业设备,价格较昂贵;由于柱容量较低,给柱后收集的各组分后续分析带来了操作困难
3 气相色谱法
气相色谱法是应用于糖蛋白寡糖链和单糖组成的结构分析常用方法,该方法主要通过化学修饰甲基化、硅烷化、乙酰化将多糖中的单糖组分转化为易挥发的衍生物进行测定。
气相色谱法具有分离效能高、测定快速、灵敏度高等特点,对各种易挥发的有机物能进行直接分析。但是糖类化合物和多元醇挥发性和热稳定性较低、沸点高,需在对其衍生化后才能用气相色谱法进行分析,而衍生化反应操作非常麻烦,且容易产生异构体,误差较大。气相色谱法灵敏度高,分离度也优于离子色谱,但气相色谱法无法分离糖醛酸,而离子色谱对糖醛酸却最有效。因此,分析方法的选择还应根据样品自身的特点与性质而定。
服务优势
百欧泰团队具有丰富的单糖组分分析经验,可提供多种服务优势:
样品需求量少、检测灵敏度高,方便快捷,对多种单糖进行定性定量分析;
设备先进,Thermo离子色谱系统配套糖化学专用色谱柱;
服务为主:可根据客户需求综合分析,设计不同的实验方案,有完善多糖降解操作;
专业的技术支持,保障强力、周到及时的售前售后服务支持,随时为您解答出现的任何问题。
服务流程
双方沟通一致后确定实验方案,确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付
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